用具有這類特點的單獨雜交瘤細胞塑造成體細胞群,可制取對于一種抗原表位的特異性抗原即單克隆抗體。
單克隆抗體界定
單克隆抗體是人力制取的雜交瘤細胞生產的,雜交瘤細胞是由一個經抗原體激話后的B體細胞與一個骨髓瘤細胞結合產生。單克隆抗體優勢:純凈度高,敏感度高,特異性強,交叉式反映少,制取的低成本。缺陷:對技術性有一定的規定,并且根據抗原體的有機化學解決非常容易遺失表位。
單克隆抗體制取全過程
1.免疫力小動物免疫力小動物是用目地抗原體免疫力小白鼠,使小白鼠造成過敏反應B淋巴細胞的全過程。一般采用6-8周齡雌蟲BALB/c小白鼠,依照事先制訂的免疫力計劃方案開展免疫力注射。抗原體根據血液循環系統或血循環進到頸靜脈免疫器官,刺激性相對B淋巴細胞復制,使其活性、繁衍,并分裂變成過敏反應B淋巴細胞。
2.細胞融合選用二氧化碳汽體處決小白鼠,無菌操作原則取下肝臟,在平皿內擠壓成型碾磨,制取脾體細胞懸液。將準備好的同系骨髓瘤細胞與小白鼠脾體細胞按一定占比混和,并添加促結合劑聚乙二醇。在聚乙二醇功效下,各種各樣網織紅細胞可與骨髓瘤細胞產生結合,產生雜交瘤細胞。
可選擇性塑造的目地是挑選結合的雜交瘤細胞,一般選用HAT可選擇性培養液。在HAT培養液中,未結合的骨髓瘤細胞因欠缺次黃嘌呤-鳥嘌呤-硫酸銨核糖轉移酶,不可以運用挽救方式生成DNA而身亡。未結合的網織紅細胞雖具備次黃嘌呤-鳥嘌呤-硫酸銨核糖轉移酶,但其自身不可以在身體之外長期性生存也慢慢身亡。僅有結合的雜交瘤細胞因為從脾體細胞得到了次黃嘌呤-鳥嘌呤-硫酸銨核糖轉移酶,并具備骨髓瘤細胞能無盡繁衍的特點,因而能在HAT培養液中生存和繁衍。