三級(jí)甲等綜合醫(yī)院國營
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(1)溶血素滴定:按表1成分、次序、劑量加入各管進(jìn)行滴定。
溶血素單位:即能完全溶解紅細(xì)胞的溶血素最高稀釋度,按上表假定結(jié)果,1∶2400稀釋度(0.1ml)的溶血素為1個(gè)單位。如實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)用2個(gè)單位,即1∶1200稀釋度(0.1ml)的溶血素溶液。
(2)補(bǔ)體滴定:將補(bǔ)體稀釋成1∶30。按表2成分、次序、劑量加入各管中作滴定,整個(gè)試驗(yàn)過程中補(bǔ)體應(yīng)放在冰水盒中,防止活性下降。
補(bǔ)體單位:即能發(fā)生完全溶血現(xiàn)象的最小補(bǔ)體量。按上表假定結(jié)果,1∶30補(bǔ)體0.12ml內(nèi)含1個(gè)單位,則0.24ml含有2個(gè)單位。為使0.2ml中含有2個(gè)單位,可按下法計(jì)算稀釋:
補(bǔ)體作1∶25稀釋后,每0.2ml中含有補(bǔ)體2個(gè)單位。
(3)抗原滴定:
①將64支試管排方陣,即8行與8排。
②先作二倍稀釋已滅活(56℃30min)的免疫血清。于第一排1~8各管中加1∶2稀釋血清0.1ml,將1∶4稀釋血清加至第二排1~8管中,如此二倍遞增稀釋血清加到第七排。第八排不加血清,以0.1ml鹽水代替,作為抗原對(duì)照。
③同上法稀釋抗原。第一行1~8各管中加1∶2稀釋抗原0.1ml,第二行中1~8各管中加1∶4稀釋抗原0.1ml,如此,二倍稀釋抗原加到第七行,第八行不加抗原,以0.1ml鹽水代替,作為血清對(duì)照。
④在各對(duì)照管中補(bǔ)充鹽水0.1ml。
⑤然后,再于每管中加入2u補(bǔ)體0.2ml,放置4℃冰箱16~18h,次日置37℃水浴箱中30min,各管中加入1.25%綿羊紅細(xì)胞及溶血素(2u)各0.1ml,再放置37℃水浴箱中30min。
⑥觀察結(jié)果:如“++++”表示補(bǔ)體完全被檢驗(yàn)系統(tǒng)所固定,呈現(xiàn)全不溶血:“-”表示補(bǔ)體完全未被檢驗(yàn)系統(tǒng)固定,呈現(xiàn)完全溶血;在二者之間不同程度者則以“+++”、“++”、“+”、“±”表示之。
抗原單位:即能與最高稀釋倍數(shù)的血清呈“++++”反應(yīng)的抗原最高稀釋倍數(shù)即為1個(gè)抗原單位,如表所示,1∶8。試驗(yàn)時(shí)用2個(gè)單位,即1∶4。
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