肝纖維化檢查

　一】實驗室檢查

　　1.反應細胞外間質(zhì)代謝的指標

　　(1)參與膠原及基質(zhì)代謝有關酶的檢測：

　　①脯氨酸4-羥化酶

　　(proline-4-hydroxylase，PH)：PH是一種糖蛋白，血清PH水平與肝纖維化程度相關。但非肝纖維化有，例如阻塞性黃疸亦可升高，現(xiàn)已有制備的PHβ亞單抗，用免疫學方法檢測血清PH含量，使敏感性提高約20倍。

　　②單胺氧化酶(MAO)：MAO參與膠原的交叉連接，使可溶性的膠原纖維分子內(nèi)發(fā)生共價交聯(lián)，從而形成不溶性的膠原纖維。血清中MAO活性的升高與肝纖維化的程度是平行的，現(xiàn)發(fā)現(xiàn)MAO有4種同工酶，其中MAO1在肝纖維化時明顯升高、但MAO測定的敏感性低，操作復雜，所以未能廣泛應用。

　　③P-Z肽酶：該酶是一種內(nèi)切酶，其活性可作為膠原降解指標，常與P-Ⅲ-P同時檢測，國外有人將P-Ⅲ-P/PZ-肽酶的比值作為肝纖維化動態(tài)非創(chuàng)傷性指標。國人殷蔚荑等對此研究，結(jié)果認為血清P-Ⅲ-P/P-Z肽酶比值隨肝纖維化程度的加劇而升高。表明P-Ⅲ-P/P-Z肽酶比值是反映膠原代謝及肝纖維化程度有益指標。

　　(2)膠原、前膠原肽及膠原代謝產(chǎn)物的檢測：

　　①Ⅲ型前膠原(PC-Ⅲ)及Ⅲ型前膠原末端肽(P-Ⅲ-P)：PC-Ⅲ由細胞分泌到血液中時，氨基(N)端和羧基(C)端肽被內(nèi)切酶切下游離在血中，隨膠原合成的活躍而增加。P-Ⅲ-P直徑為60nm，這些肽端可調(diào)節(jié)膠原纖維的直徑。1985年Galambos等以山羊胎皮中提取PC-Ⅲ，建立的RIA檢測法，測定50例肝病血清PC-Ⅲ，結(jié)果顯示PC-Ⅲ值與肝纖維活動程度相關。 1990年國人李偉道等以人胎皮中提取PC-Ⅲ建立了PC-Ⅲ的RIA法，其正常人限為120μg/L。1979年，Rohde首先從胎牛皮中提取了Ⅲ型前膠原的氨基端多肽、并建立了放射免疫法，報道P-Ⅲ-P測定在肝病診斷中的意義。至今國內(nèi)外有關P-Ⅲ-P的研究報道較多，認為P-Ⅲ-P至今仍是反映肝纖維化活動程度的良好指標，以及判斷抗纖維化藥物療程及慢性肝病預后的較好指標。但仍有一些問題需要探討。首先它無器官特異性，所以在診斷肝病時，要先除外其他疾病引起的P-Ⅲ-P升高的情況。其次，在各種肝病中血清P-Ⅲ-P含量有較大重疊所以難以確定肝病的類型。

　　②Ⅳ型膠原及其分解片段(7S片段和NC1片段)的測定：Ⅳ型膠原分布于肝竇內(nèi)皮細胞下，是構(gòu)成基底膜的主要成分，與LN有高度親合性，過度沉積使肝竇毛細血管化、肝竇組織結(jié)構(gòu)和肝血流改變，使肝營養(yǎng)受限，從而加劇肝臟病變。在肝纖維化性早期已有Ⅳ膠原的沉積，血中P-Ⅲ-P、7S、NC-1含量均增高，以7S及CN-1為明顯。有人認為血清7S及NC1含量是反映膠原合成的敏感指標。亦有報道，用酶聯(lián)法測血清Ⅳ膠原試藥盒(日本)已供應于市場。

　　(3)基質(zhì)成分改變有關指標：

　　①層粘連蛋白(LN)：LN又稱層黏素、極層素，是基質(zhì)中一種非膠原性結(jié)構(gòu)糖蛋白，為基底膜的特有成分，經(jīng)消化酶分解為7個肽片段，大部分抗原決定簇存在于片段Ⅰ(LNP1)，分子量約為250KD。現(xiàn)均使用LNPI的抗原-抗體系統(tǒng)建立RIA檢測方法，既可獲得足夠抗原，又不影響檢測的特異性與敏感性，使血清LN水平檢測方法的推廣使用成為可能。Misoki等用RIA法測定正常人與不同肝病患者的血清LN水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)正常人、慢遷肝、慢活肝和肝硬化分別1340、1600、2060和2200ng/L。目前多數(shù)學者認為，血清LN可作為診斷早期肝纖維化指標之一，但非特異的，惡性腫瘤和胰腺疾病等患者血清LN亦可升高，故LN仍有一定局限性。

　　②纖維連接蛋白(FN)及其受體(FNR)：在肝臟中，F(xiàn)N主要存在于肝竇壁內(nèi)與Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原共存，起支架作用，亦是構(gòu)成基底膜的成分。血清中FN測定國內(nèi)已有較多報道，用單擴法、血凝法和火箭電泳法測定，急性及慢性肝炎患者血清FN增高，早期肝硬化者FN亦明顯增高;而失代償后則降低。多數(shù)學者認為，不是早期診斷肝纖維化的良好指標。國外有報道，用酶聯(lián)法檢測75例經(jīng)肝活檢確診血清β-亞單位FNR的結(jié)果，認為血清FNR水平與肝纖維化程度密切相關，但未見有更多的報道證實。

　　③透明質(zhì)酸(HA)：HA是一種最單一的糖胺多糖，是由間質(zhì)細胞合成，經(jīng)淋巴路到淋巴結(jié)，最終入血。大多數(shù)HA由肝臟內(nèi)皮細胞攝取，并由間質(zhì)細胞將其降解為乙酸和乳酸，經(jīng)腎排出。有報道在117例肝病患者中，47例經(jīng)病理診斷的肝硬化者血HA均高于100μg/L，且多數(shù)高于200μg/L;70例非肝硬化者僅有26例高于100μg/L;207例正常對照者中，僅有5人高于100μg/L。國內(nèi)外已有較多關于HA在肝病中應用的報道，其結(jié)果可歸納為急性肝炎、慢遷肝、慢活肝和肝硬化血清HA均有不同程度升高，與肝臟損害程度、肝纖維化活動程度相關。但應注意，惡性腫瘤、類風濕關節(jié)炎及呼吸窘迫綜合征等患者血清HA升高。

　　2.參與調(diào)節(jié)肝纖維化形成的細胞因子檢測

　在急性肝炎的修復過程中，TGF-β1可能具有啟動膠原與其他間質(zhì)的合成作用，有人認為TGF-β1可能是聯(lián)結(jié)炎癥過程與肝纖維化兩者之間的因子。關于血清TNF-ɑ臨床已有較多報道，有人通過動物實驗與臨床研究，認為血吸蟲病肝纖維化活動程度與血清TNF-ɑ、HA相關，若在進行廣泛研究的基礎上預測血清細胞因子的水平作為活動肝纖維化診斷的輔助指標，值得深入研究。

　　二】影像學檢查

　　1、超聲波檢查

肝纖維化時有肝回聲異常的改變。

　　2.CT

CT可以發(fā)現(xiàn)肝包膜增厚，肝表面輪廓不規(guī)則或呈結(jié)節(jié)狀，肝實質(zhì)回聲不均勻增強或CT值升高，各葉比例發(fā)生改變，脾臟厚度增加，門靜脈及脾靜脈增寬。彩色多普勒可以測定肝動脈和門靜脈的血流量及功能性門-體分流情況。但總體上影像學檢查對于診斷肝纖維化不夠敏感。